老司机带你使用ImageJ高效分析图片

1、血管形成实验（Tube formation assay）是体外研究血管生成的经典方法。ImageJ官网Toolsets处下载Angiogenesis Analyzer宏可分析血管形成网络。

2、首先，让我们从基础开始，学习手动计数的技巧。通过使用Multi-Point工具，我们可以轻松地在图像中手动点击进行计数。打开ImageJ，选择需要分析的图片，点击点工具，右击后选择Multi-Point工具，点击图像上的点以计数。完成计数后，通过点击Analyze –Measure，即可查看所选点的数量。

3、基础知识准备 灰度值：在ImageJ中，灰度值用于表示图像的亮度，纯黑为0，纯白为255。这一知识点在分析划痕宽度时至关重要，因为划痕区域通常会被处理为白色或黑色，便于后续分析。Plot Profile：Plot Profile是ImageJ中的一个重要功能，它可以显示线段或矩形选框所经过范围内的灰度变化。

4、利用ImageJ进行划痕实验宽度分析的高效方法主要包括以下步骤：图像预处理：将图像转换为8bit灰度图片并进行平滑处理，以减少噪声干扰。确定划痕边缘：使用阈值工具确定划痕边缘，通过调整阈值来清除内部细胞和背景，使得划痕区域更加清晰。分析灰度变化：通过Plot Profile功能分析划痕的灰度变化。

5、功能与应用 以下通过自动获取粒径分布信息的实例，介绍ImageJ软件的使用方法。导入图片：选择“file-open”命令，导入想要分析的图片。转换图片格式：将RGB格式的图片转换为8-bit黑白图片（选择“image-Type-8-bit”），有助于设置对比度临界值。

6、找到宽度与灰度值的关联；旋转图像，利用Plot Profile数据计算宽度，注意未进行标尺校正；对所有划痕计算平均宽度，校正后得到实际距离。通过这种方法，我们能高效、准确地测量划痕宽度，提示我们在实验中要善于运用工具和思考。