1、要成为FlowJo的高手，可以遵循以下几点建议1 熟悉软件界面与基本操作 直观操作界面掌握FlowJo直观的操作界面布局，了解各个功能模块的位置和用途 基础操作熟练掌握数据的导入参数调整门控分析等基础操作，这是成为高手的基石2 优化数据处理流程 文件兼容性导出FCS文件时，选择高级；FlowJo是流式细胞分析领域的领先平台，它以其强大的数据分析能力和用户友好的界面设计，赢得了广大科研人员和临床医生的青睐以下是对FlowJo软件的详细介绍一核心功能 免疫表型分析FlowJo能够轻松处理复杂的免疫表型数据，帮助研究人员准确识别和分析不同细胞亚群细胞周期分析通过内置的细胞周期分析；1首先打开FlowJo761软件，鼠标直接拖动数据所在文件夹到软件中，数据导入2然后对数据进行处理，双击fcs格式数据出现流式散点图，圈门并点击确定3然后双击圈门部位，根据实验目的以及染料的荧光激发或者发射波长，选择流式图合适的横坐标和纵坐标4然后完成后，关闭处理界面，回到软件主；FlowJo流式数据分析基础中的常见术语包括参数图一维直方图 展示单个细胞的单参数测量数据，横轴表示荧光或散射光信号强度，纵轴表示细胞数量二维散点图 展示两个参数的二维关系，横纵坐标分别表示两种荧光或散射光强度，用于多参数数据的分析其他参数图如密度图和等高线图，用于不同形式的数据。

2、FlowJo是美国斯坦福大学Leonard Herzenberg实验室在90年代研发的一款流式数据分析软件由于其功能强大且易于使用，已经成为科研领域内的科学家实验室广泛引用的工具以下是FlowJo中一些常见术语的解释，供参考参数图 一维直方图Histogram每个细胞单参数的测量数据以直方图显示横坐标表示荧光信号或散射光信号；Flowjo图像展示方式的合理选择与适用情况主要包括以下几种展示方式等高线图特点以等高线的形式排列细胞，细胞密度大的区域等高线越高适用情况常用于弥补收集目的细胞过少导致的结果展示瑕疵，特别是在展示亚群比例时，可以改善不美观的结果展示斑马图特点是密度图和等高线图的组合，能更清晰地；本文旨在详解使用FlowJo软件调节补偿的步骤首先，我们需要理解“补偿”在流式中的作用流式实验中，抗体偶联荧光素，荧光素发射光的波长范围较大，如FITC在520nm左右，但在575nm也有激发这导致在未进行干预的情况下，PE通道也会收到FITC信号FITCPEAPCPerCP四种荧光素存在相互干扰为减少；FlowJo流式数据分析常见术语整理 一参数图 一维直方图Histogram定义每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，其单位是道数，可以是线形line或者对数log纵坐标一般是细胞数count二维散点图Dot；如上图所示，BV421FITC双参数散点图中出现了两个阴性细胞群，提示FITC和某个通道的补偿调节过度通过减少FITCAPCCY7的补偿值，可以恢复正常实验结果综上所述，使用FlowJo调节荧光补偿是一个需要细致观察和逐步调节的过程通过正确理解和应用荧光补偿的概念和方法，可以显著提高流式细胞术分析的准确性和可靠性。

3、一新版FlowJo Portal登录介绍 新版的FlowJo构建了一个新的FlowJo Portal线上管理平台，该平台使用账号+密码形式登录，一个账号可最多激活4台不同电脑，并兼容Windows及Mac版本这一改变摆脱了传统序列号绑定电脑的方式，让用户可以随时随地分析数据注册与登录流程注册账号访问FlowJo Portal中国官网；FlowJo 是一款广泛应用于生命科学研究的流式数据分析软件，其强大且易于使用的功能使其成为各高影响力期刊的首选工具本文将指引您通过五个步骤快速掌握如何使用 FlowJo 分析平均荧光强度 MFI首先，打开 FlowJo 并显示工作台接着，找到您的原始数据通常为 fcs 格式文件，使用 Ctrl+A 全选所有文件，然后直接拖拽至；揭示FlowJo数据处理的神秘面纱五个步骤轻松掌握MFI分析 FlowJo，这款由斯坦福大学Leonard Herzenberg实验室打造的流式数据分析软件，因其强大的功能和用户友好的界面，已经成为生命科学领域科学家们的得力助手它在WindowsMac和Linux等多种操作系统上表现出卓越的兼容性，深受顶级期刊青睐本文将深入解析；FLOWJO及流式使用指南 一实验准备与注意事项 实验准备至少提前2小时开始准备样本，以确保实验流程的顺利进行对于杀伤实验，建议提前3小时准备Buffer选择PBS+2%FBSPBS+2%FBS+1mMEDTAPBS三种buffer对染色没有影响，可根据实验需求选择合适的buffer实验孔数每次实验不要铺超过30个孔，以避免；1 数据导入 打开FlowJo 1072软件点击“Add Samples”按钮，选择需要处理的数据进行导入另一种方法是直接将单个数据文件或包含数据的文件夹拖拽到软件界面中，效果与上述方法相同2 横纵坐标调节 双击导入的第一组数据，得到FSCSSC散点图点击“T”按钮，选择“Customize Axis”选。

4、1打开Flowjo软件，在主界面上，找到并点击“样本”选项卡2在样本列表中，选择您要应用圈门的样本，右键点击所选样本，然后选择“编辑”3在弹出的对话框中，找到“圈门”部分，在“圈门”部分，您可以看到一个名为“圈门类型”的下拉菜单4从下拉菜单中选择“全部”，以将圈门应用到。